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琼脂糖凝胶电泳原理 琼脂糖凝胶电泳加样量

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1.琼脂糖凝胶电泳原理:琼脂糖凝胶复杂,物质分子通过时阻力大,大分子物质涌动时阻力大。所以在凝胶电泳中,带电粒子的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,还取决于分子的大小,大大提高了分辨率。但由于其孔径与蛋白质相比过大,对大多数蛋白质来说,其分子筛效应可以忽略不计,目前广泛应用于核酸的研究。琼脂糖凝胶电泳是一种使用琼脂糖作为支持介质的电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的主要区别在于,它具有“分子筛”和“电泳”的双重功能。

2.核酸是两性电解质,等电点为pH2-2.5。在常规电泳缓冲液(pH 8.5)中,核酸分子带负电荷,并在电场中移动到正极。核酸在琼脂糖凝胶中游动时,有电荷效应和分子筛效应,但主要是分子筛效应。线性双链DNA分子在一定浓度的琼脂糖凝胶中的迁移率与DNA分子量的对数成反比。分子越大,阻力越大,在凝胶孔中移动越困难,所以迁移越慢。

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