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分子生物学报告十篇

发布时间:2024-04-26 04:58:44

分子生物学报告篇1

本次研讨会共有32个报告,分别从等离子体生物效应等4个专题展开了最前沿的报道和交流。

1.1等离子体生物效应专题

本专题共有2个主题报告。日本丰桥科学技术大学的水野彰(akiramizuno)教授首先发表了题为“inactivationofBio-particlesbytheplasmaexposure”的报告,概述了该领域此前的研究成果,简述了等离子体对生物的致死效应,并详细介绍了自己课题组在利用介质阻挡放电消毒灭菌、基因毒性的酵母菌报告评价系统、噬菌体破坏和利用等离子体炬进行基因传染等方面最新研究进展。来自大连海事大学的白敏冬教授发表了题为“KillingoceanicHarmfulorganismsUsingoHRadicalsBasedonStrongelectric-fieldDischargeplasma”的主题报告,介绍了利用强放电产生的oH自由基杀灭船舱压载水中有害微生物的系统装置、工程应用,该装置取得了非常好的杀灭效果。来自浙江大学和日本丰桥科学技术大学的学者们分别发表了“由低温等离子体导致的基因破坏的单分子测量”、“水体表面大气压脉冲放电杀灭水中细菌和生物气溶胶电收集”等方面的研究报告。由低温等离子体造成生物效应和利用低温等离子体进行消毒灭菌和生物污染控制一直是低温等离子体应用领域的热点,这一议题受到了与会代表们的热烈讨论。

1.2等离子体气体净化工艺专题

本专题共有3个主题报告。来自荷兰埃因霍温科学技术大学(tU/e)的e.J.m.vanHeesch教授发表了以“FrompulsedpowertoChemicalprocessintensification”为主题的报告,介绍了脉冲电源与化工过程相匹配的相关背景,以及其中反应器阻抗、化学反应、等离子体能量密度和自身时空分布等重要影响因素,发表了他所在课题组的相关理论与实验研究成果,展示了在气体净化方面的实际工程应用。来自沙特阿拉伯阿普杜拉国王科技大学的minSukCha博士发表了题为“RecentDevelopmentinplasmaassistedCombustion”的报告,综述了近年来在等离子体助燃领域的最新进展以及其所在学校在这方面的工作。来自日本osakaprefectureUniversity的okubomasaaki教授发表了题为“DevelopmentofSuper-cleanDieselengineandCombustorUsingnon-thermalplasmaHybridaftertreatment”的主题报告,介绍了其研究的用于轮船的超净柴油机和燃烧炉系统,结合低温等离子体技术做到更高的燃烧效率,更低的颗粒物和氮氧化物排放。随后,来自国内的学者分别就“甲烷与二氧化碳的低温等离子体转化”、“介质阻挡放电氧化柴油机尾气黑烟”、“低温等离子体预处理重油废水”“、低温等离子体对壳聚糖表面处理”和“介质阻挡放电氧化元素汞”等方面分别发表了报告,在场的专家学者就此专题展开了热烈的讨论与交流。

1.3等离子体催化专题

来自英国利物浦大学的屠昕博士发表了题为“plasma-catalysisforGreenhouseGasConversionintoFuelsandValue-addedChemicals”的主题报告,论述了用于将甲烷、二氧化碳转化为合成气和其他更高价值产品的催化剂研究,介绍了介质阻挡反应器以及相关研究进展。来自中国、日本、比利时的学者就这一专题发表了“低温等离子体降解挥发性有机化合物”“、与催化结合的放电和反应器研究”等方面的报告。等离子体催化是等离子体科学技术环境应用方面重要的研究方向,其中还有很多问题尚未探究清楚,与会代表们就相关报告展开了讨论。

1.4等离子体高级氧化专题

美国佛罗里达州立大学的BruceR.Locke教授发表了题为“FormationofHydrogenperoxideUsingwaterSprayplasmaReactors”的报告,介绍了用于产生双氧水的喷雾等离子体反应器,以及该条件下双氧水形成机理和测试方法,比较了不同结构反应器对双氧水产率的影响,阐述了该方法的应用前景。来自中国、日本的学者分别发表了“反应器模拟”、“气液两相介质阻挡放电”“、芬顿试剂促进等离子体消毒与降解效果”“、等离子体光催化”、“等离子体氮氧化物存储与还原”、“水中放电等离子体震源”等方面的报告。等离子体高级氧化广泛应用于水处理领域,该方面的研究受到了很多专家学者的关注。

2会议成果及感想

本次大会比较系统和全面地展示了近年来全球低温等离子体研究者在等离子体科学与技术在环境方面的应用所取得的重要进展,对今后利用等离子体技术进行环境保护相关工作提供了宝贵的理论参考和技术借鉴。本次大会加强了各国等离子体研究者之间的交流与合作,对提升我国低温等离子科学与技术的研究水平、人才培养以及促进国际交流具有重要意义。

分子生物学报告篇2

浙江大学杨卫校长出席招待晚宴并致欢迎词。大会组委会邀请了来自澳大利亚、美国、英国、荷兰、以色列和西班牙等国家的11位著名科学家在各个专题分别发表了主题报告。此外,47位专家和学者在大会上发表了精彩的报告,会议期间会场还展出了67张学术墙报。大会报告和学术墙报比较全面地报道了当前大麦科学研究最前沿的动态和重要进展。为鼓励在大麦科学领域崭露头角的青年科学家和在校研究生,大会委托国际组委会评审出优秀学术报告奖和优秀学术墙报奖,来自英国JamesHutton研究所、拉脱维亚大学、中国农业大学和浙江大学的4位报告人荣获“青年优秀学术报告奖”,6张墙报荣获“优秀学术墙报奖”。

该奖项评委会主任、美国明尼苏达大学教授KevinSmith为获奖者颁发了证书和奖金。本次会议共收到140篇摘要和36篇全文,结集出版了《第11届国际大麦遗传学学术研讨会摘要》和advanceinBarleyScience两本会议刊物。

(1)大麦发展和经济专题。澳大利亚阿德莱德大学peterLangridge教授首先发表主题报告,他以“whyweUseBarleyforResearch”为主题,阐述了大麦科学研究、生产及利用对世界粮食和经济的影响。来自巴西和德国的研究者分别发表了大麦在巴西和欧洲的种植历史、生产及贸易的报告。大麦作为全球第四大粮食作物,在食品、饲料和啤酒工业中发挥着举足轻重的作用,这一议题受到与会代表的热烈探讨。

(2)大麦种质资源收集和利用专题。以色列海法大学eviatarnevo教授以“adaptiveevolutionofwildBarley,HordeumSpontaneum,andCropimprovement”为主题,总结了他几十年来有关野生大麦进化及遗传改良的研究成果。来自英国、意大利和日本等国的研究者分别报告了他们在野生大麦收集、遗传多态性以及重要基因利用方面取得的成果。华中农业大学、四川农业大学和成都大学的研究者报告了我国研究者在野生大麦种质鉴定、遗传分析和利用方面取得的进展。野生资源具有丰富的变异类型和遗传多态性,加强野生资源的收集和鉴定,可以丰富和拓宽栽培品种的遗传背景,通过杂交解决栽培品种缺乏优异基因的瓶颈。野生大麦是我国独有的珍贵的植物资源,已成为国际大麦研究者关注和合作研究的热点。

(3)大麦利用与产品专题。澳大利亚阿德莱德大学GeoffFincher教授以“GeneticsofCellwallsinBarley:applicationsinHumanHealth,maltingandBiofuelproduction”为主题,发表了细胞壁和大麦品质的分子遗传机制及大麦成分在人类健康、啤酒工业和生物质能源中应用的报告。澳大利亚研究者汇报了他们有关大麦淀粉酶等位基因变异鉴定的成果。我国农牧科学院的代表和与会者分享了地区青稞大麦的利用和大麦食品。大麦不仅是啤酒工业的原料,大麦籽粒含有丰富的益于人类健康的成份(如葡聚糖),对心脏病和高血压等疾病的患者有保健作用。大麦籽粒品质性状和利用,已成为农学、食品和医学等领域广泛研究的课题。

(4)生物胁迫专题。荷兰瓦赫宁根大学Rientsniks教授以“GenesthatDetermineVariationinBasalResistanceofBarleytoRustsandpowderymildews”为主题,总结了大麦锈病和白粉病的抗性遗传机制的研究进展。意大利、德国和中国(中国农业大学)的研究者在这一专题上,报道了他们在大麦条纹病、白粉病、黄矮病和花叶病毒遗传抗性方面所取得的进展,采用QtL分析、GwaS遗传分析以及图位克隆的方法,与病害抗性相关的基因位点和候选基因已鉴定,但目标基因及其抗病机理尚在研究中。

(5)非生物胁迫专题。西班牙莱里达大学GustavoSlafer教授以“physiologicaltraitstoBreedforHighYieldinawideRangeofenvironments”为主题,系统阐述了大麦生理性状与环境条件的关联以及培育高产大麦的生理学基础。德国、澳大利亚和意大利的研究者报告了他们在大麦非生物胁迫(干旱、土壤盐化、酸铝毒害和低温等)生理和耐性机理上取得的进展。“Deepphenotyping”非生物胁迫检测新技术、V-ppase(HVp10)参与盐胁迫下离子转运和mate家族基因参与耐铝毒害等研究成果备受关注。

(6)新育种方法及育种改良专题。美国俄勒冈州立大学patrickHayes教授以“plantBreedingandGeneticsprogram,Schoolofintegratedplant,Soil,andinsectSciences”为主题,阐述了大麦遗传育种程序中作物、土壤和病虫害之间的关联及解决方案。美国、英国、德国、乌拉圭和澳大利亚的育种家报告了他们在大麦育种方法和新品种选育方面取得的成果。随着测序技术和芯片技术的发展和应用,分子标记辅助选择和基因组选择等遗传学手段广泛应用于大麦育种中,对大麦农艺性状、生理性状以及品质性状的改良表现出良好的应用前景,传统育种结合分子遗传学技术促进大麦新品种的育成,是当前大麦育种专家的共识。

(7)大麦生理专题。澳大利亚国家植物功能基因中心marktester教授以“UnderstandingandmanipulatingSalinitytoleranceinBarley”为主题,系统阐述了大麦耐盐分子机制及提高大麦耐盐性的遗传改良方法。英国、德国、拉脱维亚和科威特等国家的研究者汇报了他们在植物激素、开花时间、种皮发育、花粉形成和染色体重组等生理发育过程和现象的研究进展,为揭示大麦春化、裸大麦和棱性等生理机制提供了参考和依据。

(8)育种成功经验专题。西班牙莱里达大学Jose-luismolina-Cano教授以“theSpanishnationalBarleyBreedingprogramme”为主题,分享了西班牙大麦育种所取得的成就及大麦育种计划。德国、日本和澳大利亚的研究者分别以商业杂交大麦育种程序、染色体片段代换系用于耐酸铝育种和澳大利亚大麦分子育种为主题,交流了他们大麦育种上所取得的成功经验,为国际育种同行提供了十分重要的借鉴和启示。

分子生物学报告篇3

关键词:电子专业毕业设计;问卷调查;指导模式

中图分类号:G710文献标志码:a文章编号:1674-9324(2016)14-0279-02

一、引言

毕业设计是高职院校电子类专业教学中的非常重要的环节,也是一次完整的综合实践训练的过程。通过毕业设计,既能提高学生综合运用所学的专业知识解决一般应用问题的能力,也能提高学生的创新思维意识、提升综合能力素质与电子类工程实践应用能力,对学生即将步入社会进入电子企业工作有非常大的帮助。目前,高职电子类毕业设计教学现状究竟如何,值得探讨。

二、毕业设计现状调查

毕业设计现状调查主要从时间安排、重视程度、毕业设计过程和毕业设计的感受4个维度设计问卷调查。

1.时间安排。宁波地区电子类高职院校毕业设计所安排的时间基本为大三一学年或大三下学期。

2.重视程度。对于毕业设计哪个方面最重视,学生有27%选论文格式,31%选结构设计,35%选内容,17%选创新点。而教师有33%选论文格式,37%选结构设计,18%选内容,12%选创新点。

结果显示,学生更愿关注论文内容和结构,而教师更重视论文结构和格式。

3.毕业设计过程。从选题来看,学生自主选题为主占35%,教师分配题目21%,历届毕业生的题目32%,企业题目12%。

从这一数据可以看出学生的毕业设计很少与企业的顶岗实习结合起来,学生的选题具有网络题目重复性较高,不具有研究的前沿性和创新性,并为学生参考和抄袭网络及往届毕业设计提供了方便。

从内容来看,全篇拷贝的有5%,几篇拼凑而成的21%,消化过后再整理的42%,稍微参考过一点,大部分学生自己写的30%,完全学生写的2%。

从这一数据可看出,大部分学生依赖于网络,将网上下载的论文整理而成。还有其参考文献和论文内容根本不相呼应,在答辩时更是表现出对论文并未真正理解的。

对于毕业设计有无作品要求。每个学校的要求不同,12%的学生完成了实物作品,34%的学生有模拟仿真,而54%的学生只完成了毕业论文。

以上数据可看出,教师或者专业并无实物制作要求,学生基本不会主动去完成实物制作的,只有很少学生学得好,动手能力强的才会去做实物,一般学生能去电路仿真就已经不错了。

4.毕业设计的感受。对于学生在毕业设计中最缺乏的是什么,12%学生认为是查找资料,35%的学生认为是设计方案,13%的学生认为是实物制作,40%的学生认为是理解和答辩的能力。而教师的调查则是15%认为是学生缺乏查找资料的能力,30%认为是设计方案,24%认为是实物制作,31%认为是理解和答辩的能力。

这说明学生的能力都需要加强,尤其是设计方案、实物制作及答辩能力,这需要教师平时上课时加强。毕业设计对顶岗实习起到的作用甚少,而根本无法达到毕业设计的初衷,所以不管是教师和学生都很想改变目前毕业设计的现状。

三、毕业设计现状不理想的主要问题及原因分析

从调查来看,学生的毕业设计现状不容乐观,主要体现在论文选题相似度较高,研究内容重复性较多,更存在抄袭现象严重,重视度不高等问题。为此,对现状的主要原因进行了调查、分析,并提出相应的对策。

造成电子专业毕业设计现状不理想的主要原因是:

1.时间安排不合理。毕业设计时间可因学生而异做相应的调整,不能一刀切。如果学生认为毕业设计难,在企业不能完成或没时间完成的,可将毕业设计时间和顶岗实习时间分开,毕业设计可安排在顶岗实习前,安排在大三上学期,时间为一个月,只要学生专心完成毕业设计,一个月的时间足矣。如果学生已经找好顶岗实习单位的,就可以将毕业设计与顶岗实习结合起来,既完成企业的项目也完成了毕业设计。

2.指导老师要求不高。学校或系里相关的文件规定,必须要有实物制作,论文字数,并且重复率控制在20%以下,论文格式正确,结构合理,设计方案正确,条理清晰等要求。指导教师严格按照文件规定执行,指导教师和学生都会重视毕业设计,学生在教师的监督下一定也会认真完成毕业设计。

3.写作水平有限,学生认为不会写毕业设计。教师在课程设计中最好能让学生有机会练习写设计报告或小论文。

4.对专业不感兴趣。教师在教专业课时应尽量激发学生的专业兴趣,如实在提不起个别学生的兴趣,则对于这一类学生,要求可适当降低,但是不能低于系里的底线,可挑平时课程设计里的项目或难度低的项目给这一批学生做。

四、高职院校电子专业毕业设计指导模式

为了能让高职电子专业学生能高质量地完成毕业设计,也为了指导教师能更好地指导好学生,并为提高高职电子专业毕业论文(设计)教学工作的规范化水平,使毕业设计真正达到巩固和拓展所学的基本理论和专业知识,培养学生综合应用、分析和解决实际问题的能力,培养学生的创新意识和创新能力,培养学生科学严谨的作风,以及团队合作能力、报告制作能力和语言表达能力,课题组研究了电子专业毕业设计的指导模式。

本文按照毕业设计的步骤研究电子专业毕业设计的“选题―开题―中期检查―报告和作品评审―答辩―评分及归档”六个步骤的指导模式。

1.选题:选题必须要有专业性,但并不一定是电子研发类题目。可根据教师在研课题选取子课题或者历届竞赛题目或者教师分配题目,学生自主选题的话也需要教师通过后方可开题。避免了大多数同学抄袭,而让大部分同学的毕业设计与顶岗实习岗位相结合。

2.开题:学生选题通过后,开题需完成开题报告,开题报告包括课题简介、选题依据(来源)及意义、课题的实施方案、论文(设计)工作进程及参考文献五部分内容,每一部分内容都有注释,比如课题的实施方案,包括两部分的内容要写,第一部分是设计,要完整描述实现方案,包括完成角度、采用方法、基本步骤等;最终设计方案,达到目的;要有一份设计说明书。第二部分是论文,先搜集资料,做好调研准备,然后调研基本情况,汇总、统计、提取、比较调研结果,最后再进行论证等;准确说明所要使用的方法;最终目标要明确表述出来。但需注意:这一部分的内容应该和《设计任务书》中的第一部分(设计内容)、第二部分(具体要求)的内容相对应,就是说明怎样完成和实现《设计任务书》中所规定的内容要求,但不要照抄《设计任务书》。

3.中期检查:在完成开题报告后,教师要对学生的开题报告进行中期检查,完成中期检查表,内容包括选题质量、开题报告完成情况、阶段性成果、存在主要问题、指导教师对学生的顶岗实习和毕业设计的情况做出相应的评价五部分内容。其中指导教师指出的存在的主要问题对学生接下来做的毕业设计起着重要的指导作用。

4.报告和作品评审:学生完成毕业设计终稿和实物制作后,交给指导老师进行评审。对于学生来讲,这一步骤是对他这么长时间完成的毕业设计报告和作品是否能得到导师肯定的关键环节。所以报告和作品评审必须抱着公平公正的态度评审,当然,评审需要评审标准。对于报告的标准,主要是从论文的格式、结构、内容上进行评审,其中内容包括摘要、关键词、目录、背景和意义、国内外研究现状、总体设计方案、具体的电路设计、测试方法和数据、结果分析及总结、参考文献和致谢。作品评审从作品的难度、要求、学生完成的情况以及外观、组装、焊接、工艺进行评分。

5.答辩:答辩主要审查学生的论文是否自己完成,审查学生对论文及相关知识的理解和掌握程度,审查论文是否符合格式要求等,以求进一步有所提高。学生通过答辩,让答辩组老师进一步了解论文立项的依据和学生处理课题的实际能力,另外也检查学生的ppt的制作能力、语言表达能力、现场的反应能力。答辩组教师根据学生的汇报和答辩的情况给予评价,由两部分成绩――毕业设计和答辩成绩组成,毕业设计(论文)质量应从选题对口性、信息收集处理、内容创新和实用性、文字图表规范等方面考核,答辩情况主要从学生表达、应变及解决能力等方面考核。

6.评分及归档:最后对学生的毕业设计进行评分和归档,并由分院专人整理和保管材料。学生总的评分由指导老师对学生的报告和作品评审和答辩两部分成绩组成,各占50%,归档是对学生的开题报告、任务书、论文终稿、中期检查报告、报告和作品评审表、答辩记录和答辩评分表和答辩成绩表以及成绩评定表进行存档。纸面材料要求打印装订成册,放到档案袋里,电子版的刻录成光盘进行归档。

五、总结

以宁波地区高职院校电子类专业作为调研对象,设计并实施问卷调查,主要调研了高职院校电子类专业师生对毕业设计的真实看法和做法,以及他们的期望,然后找出高职院校电子类专业毕业设计的主要存在的问题,最后,结合课题组对国内外高职院校电子类毕业设计的了解,借鉴国内外优秀的经验,从“选题―开题―中期检查―报告和作品评审―答辩―评分及归档”六个方面有针对性地提出电子类毕业设计指导模式的相关措施。特别是选题、报告和作品评审这两个环节。

参考文献:

[1]刘浩,陈学昌.提高高职电子信息类专业毕业设计质量的思考[J].电脑知识与技术,2013,(12).

[2]李小琴,叶章勇,李薇.高职院校毕业设计的教学现状及改革探讨――台湾技职院校专题制作的启示[J].宁波职业技术学院学报,2014,(10).

分子生物学报告篇4

关键词:广告;清末社会;习俗;《大公报》

中图分类号:K892文献标识码:a文章编号:1003-949X(2007)-02-0045-02

广告,旧称告白,是一种介绍商品信息、吸引人购买或支付的手段。其表现形式因时代、国家、文明水平而有所不同,它的内容亦可对当时人们的生活方式、消费倾向、教育娱乐有一定程度的反映。

19世纪的中国在西方的炮舰政策下被迫开放,而中国也被逐步拉入世界商品经济的市场,敲开中国大门的欧美各国正处于工业革命后物质文明飞速发展的阶段。物质的东西相对于政治制度和理论等精神方面的东西较易移植或引进。《大公报》自1902年6月创刊以来,所刊登的广告较为系统的反映了西方物质文化的移入给中国社会习俗带来的变化。

一、奢华、崇洋、趋新的风尚

《大公报》有关民众日常生活的广告主要可分为:外国杂货即洋货、外国产业用料、学堂书籍、娱乐及其他。其中以前二者为多。“洋货”是西洋器物的代称。开埠后,随着中外贸易的逐渐扩大,更多品种的洋货进入了中国市场。

随着洋货的愈加流行和西洋生活方式影响的扩大,人们的消费心理和消费倾向也逐渐发生了变化,越来越多的市民乐于购买和使用洋货,其消费数量迅速增长,也促使了同一广告的重复刊登,同时广告种类越加细致繁多。洋货以其特有的魅力改变着晚清市民的生活,并逐步渗透到人们衣食住行等日常消费的各个方面。“它没有大炮那么可怕,但比大炮更有力量;它不像思想那么感染人心,但却比思想更广泛地走到每一个人的生活里去。当它改变了人们的生活之后,它同时成了人们生活的一个部分了[1]”。

1、服饰的改变。随着通商口岸城市的发展和欧风美雨的侵染,西方服饰逐步传入并推行开来,指斥传统发式服饰“于时为不宜,于民为不便”[2]。曾经一度是清代男子主流服装的长袍马褂,逐渐被人们所摒弃,穿着洋装的越来越多,而且服装的穿着的等级制和各种限制被打破,穿戴可谓五花八门。蟒袍不再光是有身份、有地位人的衣服,开始趋向平民化。洋布,洋纱大量涌入中国内地,平民百姓日常穿用的服饰质料也发生了变化,穿着洋布、洋纱成了较普遍现象。义记洋行、安得利洋行、瑞和洋行等都是《大公报》广告版的老主顾,它们天天在《大公报》上宣传、拍卖各种洋布。

2、西方饮食的传入。晚清时期中国各大中城市出现了西式的“番菜馆”、“面包房”和“咖啡店”,不少中国食店也开始增营西餐和日本料理。北方的一些大中城市西餐的影响大了起来,一部分中产阶级的饮宴应酬活动从中餐馆移到西餐馆。1903年《大公报》报道,庚子之后,京津地区西餐馆多有兴建。风气所染,“满清贵族,群学时髦,相率奔走于六国饭店”[3]。另外,20世纪初,啤酒、白兰地酒、香槟酒已经传入中国,一些城市还开办了葡萄酒、啤酒酿造厂,用机械生产果酒、啤酒,使中国酒类生产进入了新的时期,其中宣化生产的香槟酒仅一元一瓶,“购觅者颇不乏人”[4]。此外,《大公报》上出售汽水、各种罐头果品、洋式点心的广告也颇多[5]。

3、西式建筑的出现。晚清时期西式住宅以其特有的豪华、坚固和独特风格,吸引了众多市民。一些上层人士热衷于花园洋房、西式公寓。中下层人士的房居从构造、用料、外观方面.为迎合社会心理也逐步洋化。沈阳地区“建筑宏丽,悉法欧西。于是广厦连云,高瓷丽日,绵亘达数十里。”海城县“商家门市,间有仿西式建筑者”。一普通民居“从前窗权,皆以纸糊,近则多仿西式,改用玻璃窗。”

4、交通工具的变化。“南舟北马”是我国传统的交通运输工具,但在清末,火车、轮船、汽车等“乃渐渐起而代替帆船骡马。帆船骡马.日就没落.轮船火车,日见勃兴。”传统的肩舆逐渐被淘汰,而代之以电车、人力车、自行车等。《大公报》上经常可以看到各种出售自行车[6]和火车的列车时刻表的广告[7]。

5、娱乐方式的改变。《大公报》曾刊有奇石展览、观看奇样花炮、洋画展览的广告,后二者还标明了参观所需的费用,一般价格都不低。当然还少不了跑马和马戏班的内容―跑马是西方人十分钟爱的户外活动,并因其趣味性及观赏性而受到许多华人(富商为主)的欢迎。看戏也是洋人喜爱的消遣方式之一,特别是国外剧团、马戏团更受欢迎,传媒也就投其所好刊登这方面的消息了,像“本园于上礼拜日加演耶稣历史,业蒙中外绅商赞赏。昨晚英国牧师来函,示本国前演此片。”[8],“大英哈马士登大马戏准今晚,所演新戏与上不同”[9]之类的广告在《大公报》上占有重要位置。可见,西方人也将其自身特有的娱乐方式带到了中国。

二、人们法律意识的提高,开始运用法律手段来维护自身利益

在交易中,各商号也像西方资本主义商界一样,愈来愈重视运用法律手段来维护自身利益,一些店铺所有权,经营权的转让,票股、信票、栈单的遗失等,其主人往往在报上登报声明,公告示人。仅1909年《大公报》上关于股票、信票、栈单遗失,登报“声明作废”的广告就有12条之多。人们法律意识提高的另一个表现就是,《大公报》上刊登了一些产品的防伪广告,如“狮子老牌牙粉紧急广告”[10]和波典精制牛乳防伪广告[11]。

三、传统婚姻观念发生变化

在古代,要求女子三从四德。讲究“父母之命,媒妁之言”。但是在清末,妇女的地位得到提高,提倡男女平等,婚姻上讲究自由恋爱,并且男子也开始注重女子的品学了。同时,婚姻的媒介方式也发生了变化,广告征婚日益普及,如:“今有南海志士某君北来游学,尚未娶妇,意欲访求天下有志女子聘定为室……一要天足;二要通晓中西学术门径;三聘娶仪节悉照文明通例,尽除中国旧有之陋俗”[12]。同时,离婚也不再是男子的专利,女子主动提出离婚者逐渐增多,成为社会一大奇观。据1913年9月5日《大公报》载:“近来法庭诉讼,男女之情离婚者,实繁有徙;此皆前所未有,而亦社会所不乐为者也”。这些广告均从一个侧面反映了当时妇女地位得到提高。

4、禁缠足,兴女学

缠足是严重戕害中国妇女健康的陋习。清末随着民族危机加深,西方天赋人权说和女权理论的输入以及社会变革的展开,逐步兴起了不缠足运动。“此缠足陋习为地球所独有,所以为五洲各国所轻笑,无一益有百害”[13],缠足是“中国妇女的大苦处,……务必要舍命的改过这风俗来”[14],这是“自强的一件大事”[15]。此外,在1902年的《大公报》上,我们可以发现许多关于妇女缠足毒害的征文广告[16]和禁缠足的广告[17]。到1910年,某些学堂招生,不缠足已成为一个条件,如北洋女医学堂招生条件中就要求“未见缠足或已放足成者”[18]。

在废除缠足的同时,社会上又掀起了兴女学运动。出现了一些专门的妇女杂志,如《女学报》、《女子世界》。出现了专门的女学堂,妇女有了更多接受教育的机会。很多女学堂在《大公报》上登载了招生广告,如北洋女子师范学堂[19]、培根两等女学堂[20]、京师既业讲习所[21]、北洋中西女学堂、普育女学堂、天津女子公学、私立丛德女学熟、北洋女医学堂,天门中西女学堂等。但是,从各女子学堂的教授内容看,女子在学堂所受的教育主要是家政、女红、孟子等传统教育,比男子所受教育的范围狭窄得多。虽然,妇女的地位取得很大提高,但是两千多年的封建传统观念不可能在一时间得到彻底改变,它的变化仍有很大的局限性。

总之,从《大公报》的大量广告中我们可以发现:清末中国的城市近代化过程加速,人们目之所及、耳之所闻都是西方传输的“新”生活方式,这些感官上的变化,不能不深入人们的思想,影响人们的行为,至1少大城市中的一部分人在物质行为方式上形成了相当明显的崇洋、趋新风气。但是旧事物不可能一下子退出历史舞台,在清末时很多地方还保留较重的封建残余,从各方面留下了新旧交替的烙印。

参考文献:

[1]陈旭麓.陈旭麓文集(第1卷)[m].华东师范大学出版,1997年版:371。

[2]剪辫易服说,《大公报》2月4日。

[3]《大公报》1903年6月21日。

[4]《大公报》1904年4月17日。

[5]《大公报》1909年12月13日。

[6]双顺义修理机器自行车行,《大公报》1902年7月6日。

[7]《大公报》1907年4月14日。

[8]富贵电戏园,《大公报》1909年2月17日。

[9]大英哈马士登大马戏准今晚所演新戏与上不同,《大公报》1909年8月4日。

[10]狮子老牌牙粉紧急广告,《大公报》1910年6月13日。

[11]波典精制牛乳防伪,《大公报》1910年9月12。

[12]征婚广告,《大公报》1902年5月22日。

[13]天津某茂才拟请袁宫保严禁缠足禀本馆附注,《大公报》1903年1月4日。

[14]苦口良药,《大公报》1902年11月20日。

[15]也算自强的一件大事,《大公报》1902年10月2日。

[16]妇女缠足议,《大公报》1902年7月12日。

[17]禁缠足广告:河北不缠足会章程,《大公报》1902年11月24日;河北不缠足会广告,《大公报》1902年11月29日;天足社征文广告,《大公报》1903年3月13日;天足会演说,《大公报》1903年5月1日。

[18]北洋女医学堂招生,《大公报》1910年7月25日。

[19]北洋女子师范招考,《大公报》1906年6月7日。

分子生物学报告篇5

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分子生物学报告篇6

关键词:《湘报》广告 湖南维新运动

现代广告作为文化产业的一部分,具有意识形态属性和物质形态属性两重特征。因此,“广告不仅是一种经济现象,而且是一种意识形态,它对社会文化和社会风气有着巨大的影响作用”。“纵观《湘报》广告传播的过程,我们不仅可以看到广告同社会经济发展的密切关系,也能够发现它同社会政治、思想文化息息相关互为作用的一面。”因此,本文拟从《湘报》广告来探析当时湖南维新运动的特点。

《湘报》广告的内容分布

《湘报》于1898年3月7日创刊于长沙,于同年10月15日被迫停刊,共出177期。《湘报》广告带有较强的公益色彩,报纸价格与广告刊价均较其他报纸为低。它免费刊登各维新派政治团体、新式学堂、学会的一些章程及捐款、捐书名单,为促进民族工商业的发展,对新办企业、各商会章程、发明创造及福利性广告等实施优待政策。

《湘报》广告开始时多为一页两面,编入每期页码,而第41期即4月21日起,广告仍为一页两面,但不计人页码。其中广告作为附张,随报免费赠送。自第98期开始,每期广告增加到两页4面,第131期又重新缩减为一页两面,至第154期又恢复为每期6页12面,广告占两页4面,第171期起仍为5页10面,广告占一页两面。总之,《湘报》广告版面始终占有全报1/5到1/3左右。综合统计,177期《湘报》共刊登各类广告1393条次(每条广告乘以其刊登次数)。平均每期刊登广告7.8条次,其中第1期、第84期、第97期、第126期和第138期完全没有刊登广告。从第39期开始(这期《湘报》刊登了9条广告),《湘报》刊登广告进入了常态,广告版面相对独立、稳定,数量也逐渐增加。刊登广告最多的是第127期、第128期、第129期和第130期,每期都刊登了19~20条广告。

《湘报》的广告内容,与《时务报》、《昌言报》等相比,《湘报》的广告数量较多。内容也较丰富,笔者在对《湘报》所刊登的1393条广告进行整理分析后,将其归纳为五类:一是出版印刷类,包括书局、图书、报纸、碑帖书画等;二是医药卫生,包括祖传儒医、丹丸奇方、施送药方药粉等:三是日用百货,包括绸缎布匹、鞋铺茶号等:四是船期信息;五是其他广告,包括遗失启事、算命堪舆、房屋招租、招生广告等。如此分类之后,我们得到如下一组数据:文化出版729条,占52.4%;日用百货159条,占11.3%;医药卫生224条,16.1%;船期信息141条,占10.1%;其他140条,占10.1%。

通过上述对《湘报》广告内容的分析,我们会发现,在《湘报》所刊登的所有广告中,以出版印刷类所占的份额最大,占了一半之强。出版印刷类的广告又以带有维新性质的图书报纸类广告最多。几乎占了90%,而其他类的广告所占份额比较少。

湖南维新运动的特点

在《湘报》所刊登的广告中,以出版印刷维新报刊、图书类的广告最多,这说明了湖南维新运动的什么特点呢?

湖南维新运动是观念先行的产物。湖南地处中国腹地,近代经济尚未启动,推动新闻事业现代化的两大力量“市场经济”和“政治民主”远未形成。“位于大陆腹地的湖南,资本主义并不活跃。湖南维新运动的开展,从客观上来说。主要是甲午战争以来民族危机的强烈刺激以及全国维新思维的影响,包括一批有名的维新人物在湖南的鼓吹和宣传。”简言之,即湖南的维新运动是观念先行的产物,是观念在牵引湖南的社会变迁,它缺少广泛的社会基础,在这里,我们看到了湖南维新运动思想意识与社会变迁的不同步。这是作为后发现代性国家和地区的普遍特点。

观念先行,这就迫切需要创办刊物、发行图书来灌输新的思想意识。因此。在《湘报》广告中,关于维新思想的新出版物占据了主要l的份额。书局营业广告,本地、外埠书局(也名之为书社或公司)共有11家在《湘报》刊登广告,长沙本地有10家。图书销售广告,题材相当广泛,在《湘报》广告中占有很大的比重;报纸销售广告,共有9家报纸在《湘报》刊登了广告;图书报纸招股广告,这种广告也很多。

与此相反的是,与百姓日常经济生活密切关联的商品与服务却只占据了较少的部分,这与西方的初期广告完全不同,在西方报业史上,广告从政治、军事、经济、文化等信息的传播,一直到个人生活的各个领域,涉及百姓生活的各个方面。在《湘报》的广告中,日用百货商品都是传统的绸缎和茶叶广告,缺少现代经济的意义,略具现代性特征的是“和丰火柴公司”和“两湖轮船公司”的广告,从这里,我们看到了现代经济在湖南的艰难发轫。

知识分子群体是湖南维新运动的主体。湖南维新运动是在学习和模仿西方和沿海地区的现代化经验上开始起步的。它与一批具有维新意识的知识分子紧紧联系在一起,如梁启超、谭嗣同、唐才常、熊希龄等,他们从传统的“士大夫”群体转换而来,深具忧患意识和民族精神,积极地投身于维新运动之中,热心地创办报纸、出版书籍、改良传统教育,力求通过维新意识的传播,来为湖南维新运动营造良好的舆论环境。因此,他们把广告也作为他们宣传维新思想的阵地。“本报专译东西各国报章杂史传记”的《译书公会报》广告,“专采访内地紧要新闻时事,选译西报,交涉要情章程体例均仿英《泰晤士报》的《时务日报》广告,“现在各种中西书籍均已购备齐全,有来阅书者请至本会掣取凭单”的“南学会”告白,这些广告表明,这些得时代风气之先的知识分子,意识到了“学战”在中国现代化运动中的地位。

具有维新意识的知识分子的数量和质量代表着现代化的水平,这是所有后发外生型国家实施现代化运动的共同特点。在甲午战争中,由湖南巡抚吴大激所率领的湘军在辽东大败,迫使湖南士人从迷梦中惊醒,开始探寻拯救湖南,进而拯救中国的途径,“光绪二十一年,湘军与日本战。大溃于牛庄,湖南人始转侧豁悟,其虚骄不可向迩之气,亦顿馁矣”,准确地反映了当时湖南士人的心态。在这种时代氛围下。首先觉醒的先进知识分子便乘此而起,形成了湖南维新士人群体。他们成为导引湖南风气变革的先导,发出了向西方学习、发展资本主义、变革社会政治的要求和呼声,在湖南形成一股巨大的社会思潮,在湖南这团死水中激起了波澜,由此导演出湖南维新运动这幕壮阔的历史剧。

湖南维新运动对政治具有高度的依赖性。在《湘报》广告中,文化出版类的广告占有绝对比重,而与经济相关的广告则明显萎缩,这说明当时的湖南维新运动是一种观念先行的“跛足”现代化运动。从世界现代化史来看。观念先行并非不能实现由传统型国家向现代型国家的转变,但与该国家所能提供的政治环境有相当大的关系,简言之。由传统向现代的转变会导致利益资源的重新分配,既得利益集团在何种程度上能够允许新的思想观念的出现便成了观念先行型现代化运动至关重要的因素。

从湖南的情况来看,湖南维新知识分子在湖南创办报刊,发行以西方知识为主要内容的书籍,创办新式教育,为湖南维新运动营造了良好的舆论环境,使地处内陆、向以保守著称的湖南成为中的佼佼者,为天下所侧目,这与当时主政湖南的官员有很大的关系。巡抚陈宝箴、按察使黄遵宪、学政江标及后来的徐仁铸等,都对维新运动持开明与支持态度,对戊戌时期湖南士林风气的变化和维新知识分子群体的形成,提供了一个相当宽松的环境。对推动湖南维新运动的发展都起过较大作用。这是湖南维新运动较别省更具生气的重要原因。与此相反的是,后期,当湖南维新运动丧失了来自政治的支持,随着陈宝箴等维新官员相继离湘。湖南维新知识分子群体面对保守势力的攻击时,几乎没有还手之力,缺少社会支持的湖南维新运动迅即失败,这说明这种观念先行型的现代化运动对政治具有高度的依赖性。

分子生物学报告篇7

一、目标与原则

(一)任务与目标

通过本方案的实施,完善组织协调机制和监测网络报告,提高应急处理和医疗救治能力。加强部门间协调,及时沟通信息,做到“早发现、早报告、早隔离、早治疗”,控制非典疫情蔓延,防止人禽流感疫情的发生和流感大流行的发生。保护人民群众身体健康,维护社会稳定。

(二)原则

预防为主,防治结合;协调配合,分级负责;依法管理,科学防治。

二、监测与报告

(一)病例诊断及报告

1、各驻街单位、社区居委会要按照《传染性非典型肺炎诊疗方案》要求发现疑似、临床诊断或实验室确诊的非典病例,按照《传染性非典型肺炎疫情监测报告实施方案》规定的报告内容、方式、时限和程序进行报告。

2、各驻街单位、社区居委会根据卫生部颁布的《人禽流感诊疗方案(试行)》发现疑似或实验室确诊的人禽流感病例,按照《人禽流感疫情报告管理方案》规定的报告内容、方式、时限和程序进行报告。

3、各驻街单位、社区居委会发现流行性感冒病例或暴发疫情,按照《突发公共卫生事件与传染病疫情监测信息报告管理办法》规定的报告内容、方式、时限和程序进行报告。

4、二级以上各级各类医疗机构发现符合不明原因肺炎病例、非典预警病例和人禽流感预警病例监测病例定义的,按照卫生部的《全国不明原因肺炎病例监测实施方案(试行)》规定的报告内容、方式、时限和程序进行报告。

(二)监测

1、各驻街单位、社区居委会发现疑似或确认的动物禽流感疫情时,要及时报告,按照规定对病、死禽密切接触者进行医学观察,并对有禽类接触史的流感样病例和不明原因肺炎病例开展监测。

2、各驻街单位、社区居委会、学校、托幼机构、建筑工地等单位一旦发现发热、呼吸道感染症状的病人异常增加时,要及时报告区疾病控制中心。

三、预防与控制

(一)开展健康教育,提高群众的防病意识

各驻街单位、社区居委会要积极开展健康教育活动,提高群众对SaRS、流感和禽流感的认知水平和心理承受能力,加强居民的健康意识和自我防护能力,鼓励群众自觉报告疾病、举报疫情和防治工作中存在的问题。

(二)疫点消毒处理

驻街单位、社区居委会要及时对非典和人禽流感疫点进行消毒处理,消毒工作参照《非典防治消毒技术指导原则》和《禽流感消毒技术方案》执行。

(三)工作人员的个人防护

捕杀、处理病、死禽的人员,在动物禽流感疫区进行相关工作的医务人员和疾病预防控制等职业暴露人员,应严格按照《禽流感职业暴露人员防护指导原则》进行个人防护。

从事非典、人禽流感病例和非典、人禽流感预警病例流行病学调查的疾病控制专业人员要严格按照有关要求做好个人防护。

(四)疫苗接种和药物预防

按照卫生部的《中国流行性感冒疫苗预防接种指导意见》,根据流感流行的高峰季节或对疫情监测结果的分析预测,在流感流行高峰前1~2个月,遵循自愿的原则,推荐重点人群,例如65岁及以上老人、慢性病患者及体弱多病者、医疗机构的医务人员、养老院、老年人护理中心的工作人员等接种流感疫苗,以减少此类高危人群感染流感和感染流感后发生并发症的机会,降低流感相关住院率、死亡率。

对动物禽流感疫情地的病、死禽密切接触者及现场处理疫情的工作人员,可应急接种本流行季节的流感疫苗,也可在省级卫生行政部门的组织下,预防性服用抗病毒药物,包括金刚乙胺和神经氨酸酶抑制剂。

(五)加强重点人群、重点地区的防治工作

各驻街单位、社区居委会要加强对果子狸等野生动物和家禽暴露人群的防治工作,加大对居民健康教育的宣传,禁止宰杀、烹饪、销售果子狸等野生动物和病禽,提倡文明的饮食习惯,开展爱国卫生运动,改善不良的环境卫生状况。同时加强对饲养、贩卖果子狸等野生动物和禽流感患病动物暴露人群的健康状况监测。

六、保障措施与应急准备

(一)分析疫情趋势,制定工作方案

各驻街单位、社区居委会要认真总结非典和今年年初动物禽流感防治工作经验和教训,对今冬明春的疫情趋势作出预测,同时有针对性地提出防治对策建议;充分论证,调整、制定、完善具有可操作性的防治工作方案。

分子生物学报告篇8

1.1数据来源

来自2013—2017年甘肃省白银市食源性疾病监测报告系统和食源性疾病暴发监测系统中上报的食源性疾病事件、报告病例、食源性疾病主动监测数据及食品中致病菌监测数据。食品中致病菌检测由白银市疾病预防控制中心检验科承担。

1.2监测内容

1.2.1项目

2013—2017年白银市发生的食源性疾病事件47起;监测医院报告的食源性疾病病例3928例;白银市第一人民医院每年采集1461例食源性疾病病例粪便标本(即主动监测),检测4种病原菌(志贺菌、沙门菌、致病大肠埃希菌、副溶血性弧菌)和诺如病毒。

1.2.2检测方法

按照国家食品安全风险评估中心编制的《食源性疾病监测工作手册》中病原体检验操作程序进行。致病微生物监测按随机抽样原则在白银市及所辖5个县(区)的综合超市、农贸市场、餐饮店、商铺、城市流动早餐、学校食堂、饮用水生产厂家采集的1638份食品样本和网店自制食品23份,共计1661份。

1.3质量控制

食品中致病菌监测由白银市卫生计生委制定方案并确定内容,县(区)疾病预防控制中心采样,市疾病预防控制中心实验室检测,实验室通过计量认定;市疾病预防控制中心培训县(区)采样人员,实验室检验人员通过省级培训。有专人负责质控,实验检测人员参加中国疾病预防控制中心和甘肃省疾病预防控制中心组织的盲样考核。样品检测过程中提供空白对照及标准菌株。检出阳性菌株报送甘肃省疾病预防控制中心复核。

1.4统计学分析

使用eXCeL录入数据、SpSS20.0软件进行统计学分析,采用卡方检验比较率的差异,检验水准α=0.05,p0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1致病食品

食源性疾病病例、食源性疾病事件和主动监测中致病微生物阳性的食品,构成差异有统计学意义(χ2=85.477,p0.05),占比最多到最少的趋势基本一致,占比最多的是水果类及其制品(分别为28.90%,44.07%),其次是混合食品、粮食类、蔬菜类和肉类等。事件原因明确的3类食品(蔬菜类、混合食品和豆制品,蔬菜类事件17起,13起为四季豆、3起为毒蘑菇、1起为曼陀罗)报告起数与病例报告数和主动监测致病微生物阳性数的趋势总体一致。

2.2水果类检测

报告病例和主动监测致病微生物阳性的水果中,最多是西瓜(分别占35.03%,36.74%),其次为桃子(分别占21.81%,13.58%)、葡萄/草莓(分别占9.64%,11.89%),两者比例相似,但构成差异有统计学意义(χ2=6.123,p0.05)。

2.3致病微生物检测

1661份食品样本中共检出致病菌113份,总检出率6.80%。主动监测和致病菌监测均检出致病微生物,主动监测检出率为31.83%,主要是致病大肠埃希菌和诺如病毒,其他68.17%病例的致病因素未知。食源性致病菌监测基本覆盖了常见食品和常见致病菌,总检出率6.80%,常见食品中均检出致病菌。致病菌监测与主动监测的检出率未呈现出一致趋势,但致病菌检出率高的食品,主动监测时检出率依然较高。

分子生物学报告篇9

顶级专家呼吁,有必要建立一个体系,用来严密监督世界各地存在潜在危害的“人造生命”实验室。美国华盛顿伍德罗威尔逊中心发出警告说,目前还没办法监控肆意进行“生物合成”的实验室,所以,无法确保它们创造的东西都是安全的。

2010年,一名科学家把合成Dna加入到一种细菌的细胞里,创造出“新”的生命形式,“合成生物学”领域由此诞生。一名牛津大学伦理学家发出警告说,它为“可能的最强大的生化武器”敞开了大门。伍德罗威尔逊中心合成生物学项目推荐利用一种“记分卡”来确保实验室能够遵循总统委员会2010年颁布的指南。当年亿万富豪企业家克莱格-文特尔创造出世界首个人造生命形式后,该委员会的13名科学家向奥巴马总统提交了一份报告。从那以后,合成生物学领域发生了变化。那些自称“生物黑客”,并把该领域称之为“DiY生物学(DiYBio)”的狂热人士,开始进行他们自己的“合成生物学”试验项目,例如麻省理工学院毕业生凯-奥尔重新改编了大肠埃希氏菌的基因组。

纽约、波士顿和旧金山都成立了自由的“绅士空间(Genspace)”生物学实验室,这里为科学家提供自行进行试验的仪器,不受法规管制。上述报告建议:“随着该领域不断进步,政府应该继续评估合成生物学研究存在的特殊安全风险。”总统委员会执行理事瓦莱丽-博纳姆说:“该委员会成员在这份报告里着重强调了合成生物学保持透明度、交换意见和责任心的必要性。”为了对第一批“合成生命形式”做出响应,奥巴马总统2年前要求该委员会提交报告。亿万富豪企业家文特尔2010年首次创造出“人造生命”并将其命名为“辛西娅”Synthia)”。

牛津大学伦理学家朱利安-萨瓦莱斯库教授提及文特尔的发现时称:“文特尔开启了人类史上最深奥的一扇门,或许它能预见人类的命运。也许未来人们会利用它制造最强大的生化武器。现在面临的一大挑战是在确保没有虫子的情况下吃掉水果。”威尔逊中心合成生物学项目负责人大卫-雷赫斯基说:“该委员会的报告是一份地标性文件,像很多此类报告一样,它促使产生了一个框架,但是目前还没有用来追踪合成生物学进展的机制。我们的目的是确保这份报告能够促使该领域发生一些改变。”

分子生物学报告篇10

关键词:玉米大斑病菌(Setosphaeriaturcica);黑色素;酵母单杂交报告载体

中图分类号:Q78文献标识码:a文章编号:0439-8114(2015)14-3542-04

Doi:10.14088/ki.issn0439-8114.2015.14.053

ConstructionofReportVectorsofmelaninHnreductaseGeneof

SetosphaeriaturcicainYeastone-hybrid

JiaHui,GUoLi-jie,menGQing-jiang,CaoZhi-yan,SonGYa-feng

(CollegeofLifeScience,agricultureUniversityofHebei/HebeiKeyLaboratoryofphysiologicalandmolecularplantpathology,

Baoding071000,Hebei,China)

abstract:accordingtotherestrictionenzymesitesofmelaninbiosynthesispromoterregionofreductasegeneSt3HnR,St4HnRandreportervectorpHiS2.1ofSetosphaeriaturcica,twopairsofprimerscontainingrestrictionenzymesitesweredesigned,thefragmentlengthabout1000bpobtainedbypCRusinggenomicDnaofS.turcica01-23strainastemplet,anddoubledigestedbythecorrespondingrestrictedenzymesrespectively,recycledandconnected,constructedtheyeastone-hybridreportervectorofreductasegene.theresultsshowedthatthefragmentlengthoftwogeneswereboth998bp,vectorsweresuccessfullyconstructedbypCR,sequencing,restrictionenzymedigestion,andlaythefoundationforthestudyofthetranscriptionfactor.

Keywords:Setosphaeriaturcica;melanin;reportvectorsoftheyeastone-hybridsystem

玉米大斑病是玉米(ZeamaysL.)的重要叶部病害,病斑呈梭形,直接影响玉米的产量和品质,造成严重的经济损失[1]。玉米大斑病菌(Setosphaeriaturcica)是引起玉米大斑病的一种丝状病原真菌,在其侵入寄主过程中,主要依靠附着胞产生机械压力穿透植物表皮细胞[2,3]。成熟的附着胞内沉积着一层黑色素,黑色素是由病菌产生的一种非均质的不溶于水的无定形小颗粒状类多酚聚合体,其作为重要的毒力因子,在维持附着胞内机械压力方面起着重要的作用。玉米大斑病菌能够代谢DHn黑色素,其在病菌附着胞壁上的沉积,保证了病菌能够产生足够的膨胀压力而穿透寄主组织致病[4]。对不同病原真菌中DHn黑色素合成途径的研究结果表明,DHn黑色素合成途径起始于聚酮体合成酶(polyketidesynthase),其后经2个还原酶(Hnreductase)、2个脱水酶(Scytalonedehydratase)和1个氧化酶(Laccases)催化聚合而形成黑色素,另外还存在一个调控黑色素生物合成的转录因子(mR)[5]。在玉米小斑病菌(Helminthosporiummaydis)、水稻胡麻斑病菌(Bipolarisoryzae)中均存在该转录因子,其对黑色素合成酶基因的转录具有调控作用[6,7]。河北农业大学真菌霉系与植物病理学实验室根据其他真菌中已知DHn黑色素调控基因设计引物获得StmR1基因片段,并通过RaCe(RapidamplificationofcDnaends)技术得到该基因全长。

研究蛋白质与Dna互作的方法很多,包括Dna蛋白质印迹杂交、凝胶阻滞电泳、Dnasel足迹法、Dna与蛋白质复合体的电镜观察、紫外交联法、体内交联与免疫沉淀相结合等[8]。酵母单杂交体系(Yeastone-hybridsystem)是一种识别稳定结合于Dna上的蛋白质的研究技术,它是根据Dna结合蛋白(即转录因子)与Dna顺式作用元件结合调控报告基因表达的原理来研究目的转录因子与基因(Dna或cDna)互作的体系,该方法也是在细胞内分析鉴定转录因子与顺式作用元件结合的有效方法[9,10]。真核生物中各种转录因子在转录水平的调控是基因表达调控的主要方式。典型的转录因子都有Dna结合区与转录激活区(或抑制区),在特定的时间、部位或特定条件(如胁迫条件)下,特定的转录因子与靶基因启动子的顺式作用元件特异性结合并相互作用,就可以激活或抑制靶基因的表达[11]。要阐明细胞内各种信号转导与基因表达的机制,以及细胞对外界环境刺激引起的一系列信号传递与应答基因表达调控等机理,鉴定各种调控基因表达的顺式作用元件和转录因子至关重要。本研究构建了玉米大斑病菌黑色素合成还原酶基因St3HnR、St4HnR启动子区酵母单杂交报告载体,为探究转录因子StmR1和还原酶基因St3HnR、St4HnR的作用机制奠定基础。

1材料与方法

1.1材料

玉米大斑病菌菌株01-23、大肠杆菌(eschrichiacoli)DH5α感受态细胞、SDS碱裂解溶液由河北农业大学真菌毒素与植物分子病理学实验室保存或制备,pHiS2.1载体由河北农业大学生命科学学院张彩英教授惠赠;质粒提取试剂盒、凝胶回收试剂盒、taqDna聚合酶、dntps、限制性内切酶、t4Dna连接酶、pmD?R19-tSimpleVector购自宝生物工程(大连)有限公司;引物合成与序列测定由生物工程技术(上海)有限公司完成。

1.2方法

1.2.1pCR扩增根据St3HnR、St4HnR启动子区的基因序列和载体pHiS2.1上的多克隆位点分别设计一对引物,并分别添加Saci、Spei和ecoRi、Spei酶切位点,引物序列见表1。采用CtaB法提取玉米大斑病菌01-23菌株基因组Dna[12],用于pCR反应模板,扩增体系为Dna2μL,10×taqBuffer(mg2+)2.5μL,dntps(2.5mmol/L)2μL,taqDna聚合酶(5U/μL)0.3μL,3HpF(4HnF)(10μmol/L)1.0μL,3HpR(4HpR)(10μmol/L)1.0μL,加ddH2o至25μL。pCR扩增程序为95℃预变性5min;94℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,30个循环;72℃延伸10min。pCR扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测,用紫外凝胶成像仪(Bio-Rad)观察结果,凝胶回收试剂盒回收扩增产物。

1.2.2St3HnR、St4HnR基因启动子区的克隆将凝胶回收的目的基因片段与pmD?R19-tSimpleVector16℃连接30min或过夜。连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,随机挑取白色单菌落于3mL含100μg/mLamp+的LB液体培养基中,37℃下220r/min振荡培养过夜。取2μL菌液作为模板,利用pmD19-tSimple载体克隆载体上的通用引物m13+和m13-进行pCR检测。选取pCR检测阳性的单克隆测序,将测序正确的阳性克隆分别命名为pmD19-3HnRp、pmD19-4HnRp。

1.2.3酵母单杂交报告载体的构建采用SDS碱裂解法制备质粒Dna。将质粒pmD19-3HnRp、pmD19-4HnRp以及pHiS2.1载体分别进行双酶切,电泳检测并回收酶切目的片段进行连接反应,连接完毕后转化大肠杆菌感受态细胞,提取阳性克隆质粒酶切验证,构建完成St3HnR、St4HnR基因启动子酵母单杂交的报告载体pHiS-3HnRp、pHiS-4HnRp。

2结果与分析

2.1St3HnR、St4HnR基因启动子片段的扩增

分析St3HnR、St4HnR基因启动子区序列的酶切位点,结合酵母单杂交报告载体质粒pHiS2.1上的多克隆位点,分别选用限制性内切酶Saci、ecoRi和Spei,设计2对带有酶切位点的特异引物扩增目的片段,分别得到998bp两条条带,与预期大小相符(图1)。

2.2St3HnR、St4HnR基因启动子的克隆

回收纯化片段并与pmD?R19-tSimpleVector连接,转化大肠杆菌感受态细胞,转化后选择单克隆进行菌液检测,引物用载体通用引物m13/m17和特异引物3HpF/3HpR和4HnF/4HnR进行pCR扩增(图2)。选取pCR鉴定为阳性的克隆送生工生物工程技术(上海)有限公司测序,并命名为pmD19-3HnRp、pmD19-4HnRp。

2.3pmD19-3HnRp、pmD19-4HnRp的酶切鉴定

将与pmD?R19-tSimpleVector载体连接并且测序正确的单克隆pmD19-3HnRp、pmD19-4HnRp分别用Saci和Spei,ecoRi和Spei进行双酶切验证,均得到预期大小的目的条带(图3),成功克隆得到St3HnR、St4HnR基因启动子。

2.4pHiS2.1载体酶切鉴定

提取pHiS2.1载体质粒,用Saci和Spei,ecoRi和Spei进行双酶切并回收,得到7190bp大小的片段,所得片段与预期结果一致(图4)。

2.5St3HnR、St4HnR基因启动子酵母单杂交报告载体的构建

将pmD19-3HnRp和pHiS2.1质粒载体分别用Saci、Spei进行双酶切,回收目的片段后将带有相同黏性末端的3HnRp和线性的pHiS2.1连接,得到pHiS-3HnRp重组载体。将pmD19-4HnRp与pHiS2.1分别用ecoRi、Spei进行双酶切,回收纯化目的片段后再连接,得到pHiS-4HnRp重组载体。pHiS-3HnRp、pHiS-4HnRp重组载体全长约8200bp,Saci与Spei双酶切得到大小为7190bp和998bp的条带,ecoRi与Spei酶切得到大小为7190bp和998bp条带,结果均与预期大小相符(图6),玉米大斑病菌黑色素还原酶基因启动子的酵母单杂交载体构建成功。

3小结与讨论

目前,在研究Dna-蛋白质相互作用中,酵母单杂交体系主要有以下3种用途:①确定已知Dna-蛋白质之间是否存在相互作用;②分离编码结合于目的顺式调控元件或其他短Dna结合位点蛋白的新基因;③定位已经证实的具有相互作用的Dna结合蛋白的Dna结合结构域以及准确定位与Dna结合的核苷酸序列[13]。应用酵母单杂交体系已经识别并验证了许多与目的Dna序列结合的蛋白质。

StmR1基因是DHn黑色素合成途径中的具有转录调控作用的转录因子,St3HnR、St4HnR基因是该途径中编码还原酶的基因。据报道,瓜类炭疽病菌、玉米小斑病菌中调控基因CmR1的转录产物直接或间接作用于还原酶基因,影响其表达,进而影响黑色素的合成[5,6]。本试验构建了玉米大斑病菌黑色素合成还原酶基因St3HnR和St4HnR的酵母单杂交报告载体,为其研究调控基因的互作机制奠定了基础。

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